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______________________________________________________ Revista Cientíca, FCV-LUZ / Vol. XXXIII, Supl. Esp., 148 - 152, 2023
Problemas reproductivos en vacas búfalo de agua
asociados a leptospirosis genital no diagnosticada.
Resultados preliminares
Rosaura Pérez-Gil*
Centro Diagnóstico Veterinario Rosaura Pérez-Gil, Araure,
Venezuela.
*Autor de correspondencia: Rosaura Pérez-Gil, (rperezgil@gmail.com).
RESUMEN
La leptospirosis en búfalas puede provocar abortos,
muerte fetal, partos prematuros y nacimiento de terneros débi-
les y/o de bajo peso; sin embargo, la subfertilidad y la muerte
embrionaria temprana han sido poco estudiadas. Además, no
se comprende del todo si estos problemas reproductivos es-
tán asociados con la persistencia de las bacterias en el tracto
reproductivo. El objetivo principal de esta investigación es de-
mostrar la presencia de la bacteria Leptospira spp. en el tracto
genitourinario de las hembras de Bubalus bubalis. Para ello, se
llevaron a un matadero muestras de 25 hembras de 4 granjas
con bajo rendimiento reproductivo, y se recolectaron muestras
de útero, oviductos, ovarios y riñones. Se cultivaron muestras
de tejido fresco en el medio líquido Ellinghausen-McCullou-
gh-Johnson-Harris (EMJH), un medio selectivo para Leptos-
pira. Además, se prepararon muestras de tejido para análisis
histológico mediante jación en una solución tamponada de
formaldehído al 10% y se tiñeron con hematoxilina y eosina.
Se realizó PCR en nueve muestras de cultivo para la identi-
cación de Leptospira spp., utilizando dos pares de cebadores
para los marcadores, G1-G2 derivados de una secuencia de
Reproductive problems in water bualo cows
associated with non-diagnosed genital lepto-
spirosis. Preliminary results
Rosaura Pérez-Gil*
Centro Diagnóstico Veterinario Rosaura Pérez-Gil, Araure,
Venezuela.
*Corresponding author: Rosaura Pérez-Gil, (rperezgil@gmail.com).
ABSTRACT
Leptospirosis in female bualoes can cause abortions,
fetal death, premature calving, and the birth of weak and/or
underweight calves; however, sub-fertility and early embryonic
death have been little studied. In addition, it is not completely
understood whether these reproductive problems are associat-
ed with the persistence of the bacteria in the reproductive tract.
The main goal of this research is to demonstrate the presence
of the bacterium Leptospira spp. in the genitourinary tract of
Bubalus bubalis females. For this, samples of 25 females from
4 farms with poor reproductive performance were brought to a
slaughterhouse, and samples of uteri, oviducts, ovaries, and
kidneys were collected. Fresh tissue samples were cultured in
the liquid Ellinghausen–McCullough–Johnson–Harris medium
(EMJH), a selective medium for Leptospira. In addition, tissue
samples were prepared for histological analysis by xation in a
10% buered formaldehyde solution and stained with hematox-
ylin and eosin. PCR was performed on nine culture samples for
identication of Leptospira spp., by using two pairs of primer for
the markers, G1-G2 derived from a sequence from the genom-
ic library of L. interrogans serovar icterohaemorragiae, strain
AHOH-171 Rev. Cientif. FCV-LUZ, XXXIII, SE, 149-150, 2023, https://doi.org/10.52973/rcfcv-wbc030
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13th World Bualo Congress ~ 13er Congreso Mundial de Búfalos / Short oral communications / Animal Health & One Health ____________
RGA, which was described by Gravekamp et al. (1993) and
Internal 1 and Internal 2 derived from the sequence of the gene
encoding the LipL32 protein and specic to identify pathogenic
Leptospira, described by Haake et al. (2000). The reproductive
eciency of the farms was characterized by prolonged days
open and calving intervals (average of 307 and 587 days, re-
spectively). In addition, the abortion rate averaged 40%, and
the occurrence of hemoglobinuria, jaundiced vaginal mucosa,
and congestive vaginal mucosa were 32%, 16%, and 24% re-
spectively. The histological examination revealed uterine uid
(68%), uterine brosis (48%), chronic non-suppurative endo-
metritis in 68%, severe glandular atrophy in 44%, and hemor-
rhage in the perimetrium in 60%. In oviducts, broplasia was
observed in 52% of samples and salpingitis in 32%, while in
kidneys, chronic interstitial nephritis was observed in 56% of
samples. At the ovary level, 16% of follicular cysts, 20% of atro-
phy, and persistent corpus luteum in 28% were observed. The
tissue culture was positive for Leptospira spp. in the following
percentages: uterus 76%, ovary 84%, oviduct 88%, and kidney
96%. PCR using the marker G1-G2 revealed the presence of
Leptospira DNA in 55.5% of uterus, ovary, and oviduct sam-
ples, and 44.4% of kidneys; and using the primer Internal 1 and
2 identied pathogenic Leptospira spp, in 55.5% of the uter-
us and kidney samples, 33.3% in ovaries and 66.6% oviduct.
These results show reproductive problems in female bualoes
associated with genital leptospirosis. These ndings suggest
the need to develop new approaches for diagnosing this pathol-
ogy using molecular techniques and bacterial cultures, as well
as the evaluation of new prophylactic and therapeutic alterna-
tives to avoid the colonization of the reproductive tract.
Keywords: sub-fertility, genital tract, jaundice, histologic &
pathologic, PCR.
la biblioteca genómica de L. interrogans serovar icterohae-
morragiae, cepa RGA, que fue descrita por Gravekamp. et al.
(1993) e Internal 1 e Internal 2 derivados de la secuencia del
gen que codica la proteína LipL32 y especíco para identi-
car leptospiras patógenas, descrito por Haake et al. (2000). La
eciencia reproductiva de las granjas se caracterizó por días
abiertos prolongados e intervalos entre partos elevados (pro-
medio de 307 y 587 días, respectivamente). Además, la tasa
de aborto promedió el 40% y la aparición de hemoglobinuria,
mucosa vaginal con ictericia y mucosa vaginal congestiva fue
del 32%, 16% y 24% respectivamente. El examen histológico
reveló líquido uterino (68%), brosis uterina (48%), endometri-
tis crónica no supurativa en 68%, atroa glandular severa en
44% y hemorragia en el perimetrio en 60%. En oviductos se
observó broplasia en el 52% de las muestras y salpingitis en
el 32%, mientras que en riñones se observó nefritis intersticial
crónica en el 56% de las muestras. A nivel de ovario se obser-
vó un 16% de quistes foliculares, un 20% de atroa y cuerpo
lúteo persistente en un 28%. El cultivo de tejido fue positivo
para Leptospira spp. en los siguientes porcentajes: útero 76%,
ovario 84%, oviducto 88% y riñón 96%. La PCR utilizando el
marcador G1-G2 reveló la presencia de ADN de Leptospira
en el 55,5% de las muestras de útero, ovario y oviducto, y en
el 44,4% de los riñones; y mediante el cebador Interno 1 y 2
se identicaron Leptospira spp patógenas, en el 55,5% de las
muestras de útero y riñón, el 33,3% en ovarios y el 66,6% de
oviducto. Estos resultados muestran problemas reproductivos
en búfalas hembras asociados con leptospirosis genital. Estos
hallazgos sugieren la necesidad de desarrollar nuevos enfo-
ques para el diagnóstico de esta patología mediante técnicas
moleculares y cultivos bacterianos, así como la evaluación de
nuevas alternativas prolácticas y terapéuticas para evitar la
colonización del tracto reproductivo.
Palabras clave: subfertilidad, tracto genital, ictericia, histológi-
co y patológico, PCR.
