Depósito Legal ppi 201502ZU4668
Vol. 26, No 3, 4
Julio - Diciembre 2018
An International Refereed Scientic Journal
of the Facultad Experimental de Ciencias
at the Universidad del Zulia
Esta publicación cientíca en
formato digital es continuidad
de la revista impresa
Depósito Legal: pp 199302ZU47
ISSN: 1315-2076
Scientic Journal from the Experimental Faculty of Sciences,
at the Universidad del Zulia Volume 26 Especial N° 3, 4, Julio - Diciembre 2018
CIENCIA 26 (3,4), 84 - 88, 2018
Maracaibo, Venezuela
Caracterización química y contenido de compuestos fenólicos totales
de hojas de Moringa oleífera Lam cultivadas en el estado
Zulia, Venezuela
Viluzca Chiquinquirá Fernandez Palmar
1*
y Joan Vílchez Chávez
2
1
Universidad del Zulia. Facultad Experimental de Ciencias. Departamento de Química. Laboratorio de Alimentos
2
Moringales Biotech and Food C.A.Nude Agroalimentario Palito Blanco, Parcelamiento lo De Dlria.
*Fvilu12@gmail.com
Recibido: 11-09-18 Aceptado: 23-1018
Resumen
Se evaluaron las propiedades químicas y el contenido de compuestos fenólicos totales de hojas de Moringa
oleífera Lam cultivadas en el estado Zulia. la caracterización sicoquímica se realizó de acuerdo a lo establecido
por la A.O.A.C. La determinación de compuestos fenólicos totales se realizó por el método de Folin-Ciocalteu
y el contenido de minerales empleando espectrometría de absorción atómica. Las hojas de moringa presentaron
un contenido de 21 mg/100mg de proteínas siendo este constituyente el de mayor importancia desde el punto
de vista nutricional. El mineral calcio (Ca) fue el más abundante (0,15 mg/100mg) seguido de sodio (Na) y
hierro (Fe) con contenidos de 0,33mg/100mg respectivamente. No se determinaron cantidades signicativas de
potasio (K) y cobre (Cu). Los extractos de Moringa oleífera Lam fueron obtenidos empleando solución etanólica
al 70% con dos técnicas de extracción (1) maceración con agitación mecánica y (2) extracción con ultrasonido.
Las muestras obtenidas con extracción ultrasónica presentaron un contenido de compuestos fenólicos totales
18,70 ±0,032 mg GAE/100g, mayores a los obtenidos por agitación mecánica lo que demuestra que la técnica
empleada afecta la extracción de estos compuestos en la matriz. Los ensayos de screening toquímico de los
extractos de hojas de Moringa oleífera indicaron la presencia de avonoides, toesteroles, taninos y diterpenos
por los cuales se puede inferir que los extractos pueden presentar actividad cito génica de interés. Las hojas de
Moringa Oleífera Lam pueden constituir una fuente de interesante de macro nutrientes, micronutrientes y
compuestos funcionales, antioxidantes tipo compuestos fenólicos para la dieta.
Palabras claves: Moringa oleífera, compuestos fenólicos.
Chemical characterization and total phenolic content of Moringa oleífera Lam
leaves grown in the state of Zulia, Venezuela
Abstract
The chemical properties and content of total phenolic compounds of Moringa oleifera Lam leaves grown in
the state of Zulia are evaluated. The physicochemical characterization was carried out according to established
by the A.O.A.C. The determination of total phenolic compounds was carried out by the Folin-Ciocalteu method
and the mineral content using atomic absorption spectrometry. The morning leaves since they present a content
of 21 mg/100 mg of proteins, this constituent being the most important from a nutritional point of view. The
mineral calcium (Ca) was the most abundant (0.15 mg/100mg) followed by sodium and iron with contents of
0.33mg/100mg. No signicant amounts of potassium (K) and copper (Cu) were determined. Moringa oleifera
Lam extracts were obtained using 70% ethanolic solution with two extraction techniques (1) maceration with
mechanical stirring and (2) extraction with ultrasound. The samples obtained with ultrasonic extraction
presented a content of 18.70 ± 0.032 mg GAE / 100g, higher than those obtained by mechanical stirring, which
shows that the technique used aects the extraction of these compounds in the matrix. The phytochemical
screning tests of Moringa oleifera leaf extracts indicated the presence of avonoids, phytosterols, tannins and
diterpenes by which it can be inferred that the extracts may present cytogenetic activity of interest. Moringa
Oleífera Lam leaves can be an interesting source of macro-nutrients, micronutrients and functional compounds,
antioxidants such as phenolic compounds for the diet.
Key words: Moringa oleifera, phenolic compounds.
DOI: https://www.doi.org/10.5281/zenodo.5590932
85V. Fernandez P. y J. Vílchez C./ Ciencia Vol. 26, Número Especial (2018) 84-88
Scientic Journal from the Experimental Faculty of Sciences,
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Introducción
Los compuestos fenólicos son sustancias orgánicas
ampliamente distribuidas en el reino vegetal, se
sintetizan como compuestos secundarios y son en
gran medida responsables de las propiedades del
color, la astringencia y el aroma de los vegetales 1,2
Las propiedades anti-radicales libres de los fenoles
se dirigen fundamentalmente hacia los radicales
hidroxilos y superóxidos, especies altamente
reactivas implicadas en el inicio de la cadena de
peroxidación lipídica, previenen la agregación
paquetería y protegiendo a las lipoproteínas de baja
densidad de la oxidación 3. Los antioxidantes pueden
denirse como sustancias que previenen o inhiben
la oxidación de biomoléculas a nivel celular 2. En
condiciones normales el organismo humano cuenta
con sistemas antioxidantes los cuales mantienen
el equilibrio redox a nivel celular, sin embargo, un
incremento de estos radicales libres puede modicar
importantes moléculas como el ADN, lípidos y
proteínas afectando su funcionalidad y causando un
desbalance en la producción de especies reactivas
de oxígeno y en la defensa antioxidante provocando
un daño oxidativo conocido como estrés oxidativo,
el cual se ha asociado a varias enfermedades
humanas incluidas: cáncer, neurodegeneración,
enfermedades inamatorias, cardiovasculares y
envejecimiento 4,5. Moringa oleífera, es un árbol
perteneciente a la familia Moringaceae, es nativo
de las estribaciones meridionales del Himalaya y
en la actualidad se cultiva prácticamente en todas
las regiones tropicales, subtropicales y semiáridas
del mundo. Las hojas, ores y frutos son apreciados
por su valor nutritivo y pueden ser usados tanto
en la alimentación humana como en la animal.
Las raíces presentan dos alcaloides, la moringina
y moringinina, cuyos efectos alucinógenos
cuestionan su uso sin nes médicos supervisados.
Las hojas son excepcionalmente ricas en vitaminas y
diferentes aminoácidos, por lo que se recomiendan
para tratar problemas de malnutrición en niños 6,7.
Los compuestos fenólicos presentes en Moringa
incluye avonoides, antocianos, proantocianidinas
(o taninos condensados), quercentina, kaempferol,
cinamatos y formas derivadas del ácido cafeico
que tienen importante actividad antioxidante y
microbiana 8.
Materiales y métodos
1. Obtención de la materia prima
El material vegetal analizado fue provisto por
Moringales Biotech and Food C.A. estado Zulia-
Venezuela. El muestreo de las hojas se realizó
durante el periodo seco (mayo 2018), las hojas
recolectadas fueron almacenadas en cajas de
polietileno y trasladadas al área de deshoje, lavado
y deshidratado. El secado del material se realizó
empleando un deshidratador de las siguientes
características: 2m x 0,50m x 1m con 20 bandejas
de malla metálica, 2 ventiladores de extracción
con resistencia-controlador eléctrico 001CC a una
temperatura de 35-40 ºC durante 24h-36h hasta una
humedad aproximada de 5%. La muestra secada fue
pulverizada empleando un molinillo TURMEX® y
posteriormente tamizada con un tamiz de apertura
20 mech (apertura de 850 µm). Se tomaron (3)
muestras de 60 g, las cuales se almacenaron en
envases ámbar y fueron mantenidos en un desecador
protegido de la luz hasta su análisis.
2. Caracterización sicoquímica de las
muestras de Moringa Oleífera Lam.
Se evaluaron los parámetros acidez iónica,
humedad, grasa, proteínas y carbohidratos de
acuerdo a lo establecido por la Association of
Ocial Agricultural Chemists (AOAC). El contenido
de metales calcio, hierro, potasio, sodio y magnesio
se realizó en un espectrofotómetro AA- Shimadzu
modelo AA 3250 previa digestión acida con ácido
nítrico empleando sistemas cerrados.
3. Contenido de compuestos fenólicos
totales
Obtención de los extractos: Se emplearon
dos métodos de extracción: (1). Maceración con
agitación mecánica y (2). Agitación Ultrasónica
de alta intensidad (USAI). Se empleó etanol al
70% (v/v) agente de extracción bajo condiciones
previamente establecidas
11,12
. Una vez obtenidos los
extractos se centrifugaron (20 min y 12.000 rpm) y
se concentraron a presión reducida en un evaporador
giratorio (Buchi Rotavapor R-215, Suiza) bajo vacío
controlado. Los extractos se almacenaron a -5ºC en
envases ámbar hasta su análisis el cual se realizó
en un tiempo no mayor de 48h desde su obtención
para evitar el deterioro de los compuestos fenólicos
extraídos.
Puricación de compuestos fenólicos totales: Para
evaluar la calidad fenólica de los extractos estos se
separaron empleando cartuchos C
18
(Alltech® Maxi-
Clean™ Cartridges, Hight Flow tamaño de partícula:
100μm y tamaño de poro: 60Å). Los extractos se
concentraron a sequedad en un rotavapor giratorio
(Buchi Rotavapor R-215, Suiza) unido a una bomba
de aspiración a 45 ° C. Las muestras se re-diluyeron
con agua acidicada (HCl al 0,01%) y pasadas por
los cartuchos C18 previamente activados con 20
mL de metanol acidicado, seguido de 30 mL de
agua acidicada, los compuestos solubles en agua,
incluyendo azúcares y ácidos, se eluyeron con 30
mL de agua acidicada y los compuestos fenólicos se
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Tabla 1. Caracterización química y evaluación nutricional de hojas deshidratadas de
Moringa oleífera Lam
ANÁLISIS QUÍMICO VALOR OBTENIDO
Humedad (% m/m) 5,32±0,13
pH 4,22±0,005
Grasa total, mg/100mg 11,01±0,012
Carbohidratos totales, mg/100mg 42
Proteínas, mg/100mg 21,12±0,01
Calcio, mg/100g 0,15±0,001
Cobre, mg/100mg No detectable
Hierro, mg/100mg 0,066±0,0012
Potasio, mg/100mg No detectable
Sodio, mg/100mg 0,33±0,005
Manganeso, mg/100mg 0,066±0,0011
Nota:
1
Valores promedio del análisis de las muestras por triplicado ± desviación estándar
recuperaron con 15 mL de metanol acidicado. Los
extractos se emplearon para cuanticar el contenido
de compuestos fenólicos totales.
Determinación del contenido de compuestos
fenólicos totales: Se realizó empleando el reactivo
Folin Ciocalteu según lo reportado por Singleton y
Rossi
13
. Los resultados se expresaron en equivalentes
de ácido gálico (GAE, por sus siglas en inglés: Galic
Acid Equivalents).
Screening toquímico.de extracto etanólico
de Moringa Oleífera Lam: La caracterización
toquímica del extracto de hojas de Moringa
oleífera Lam incluyo las pruebas de avonoides
(Shinoda y Reactivo Alcalino), esteroides (ensayos
de Salkowski y Liebermann Burchard), saponinas
(ensayo de espuma), taninos (ensayo del cloruro
férrico y ensayo de gelatina), fenoles (ensayo de
FeCl
3
) y alcaloides (ensayos de Mayer, Wagner y
Dragendro) de acuerdo a lo señalado por Tiwari
y col.
15
El extracto analizado fue el obtenido luego
de la extracción (ambos métodos) sin realizar el
tratamiento de micro extracción con Cartuchos C8
Resultados y Discusión
1. Caracterización sicoquímica de hojas
deshidratadas de Moringa oleífera Lam
En la Tabla 1 se muestran los resultados de la
caracterización química y evaluación nutricional
de hojas deshidratadas de Moringa oleífera Lam.
Los parámetros sicoquímicos humedad y pH
cumple con lo establecido por el Reglamento
Técnico Centroamericano RTCA67.04.50:08 para
este tipo de muestras. Las hojas presentaron un
contenido proteico de 21mg/100mg el cual puede
ser benecioso para su implementación como fuente
exógena de este componente a la dieta. El contenido
de metales como hierro y manganeso constituye de
las hojas de moringa un aporte para el suplemento
de estos en la dieta. El hierro y manganeso han
sido reportados como minerales esenciales para
el mantenimiento del organismo, el primero es
esencial para producir las proteínas hemoglobina y
mioglobina que transportan el oxígeno a la sangre
y el segundo es fundamental para la activación
de diversas enzimas, la correcta utilización de
las vitaminas B
1
y E y necesario para sintetizar la
aceltilcolina y un neurotransmisor cuya deciencia
puede estar conectada a la diabetes mellitus,
además participa en la producción de anticuerpos,
protegiendo al organismo de infecciones
2
.
2. Contenido de compuestos fenólicos
totales
Determinación del contenido de compuestos
fenólicos totales. El contenido de compuestos
fenólicos totales en extracto crudo y puricado se
muestra en la Tabla 2.
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Tabla 2. Contenido de compuestos
fenólicos totales de hojas deshidratadas de
Moringa oleífera Lam
Extractos fenólicos
puricados
(mg/ g extracto seco)
Observación
experimental de
interés
7,23±0,077
b
Extracto etanólicos
(maceración con
agitación mecánica)
18,70 ±0,0,32
a
Extracto etanólicos
(USAI)
a,b Índices de Duncan diferentes indican
diferencias signicativas entre la serie de datos
(p<0,05)
El contenido de compuestos fenólicos en
las muestras analizadas fue superior (p<0,05)
cuando se empleó USAI para la extracción de estos
compuestos. La aplicación de ultrasonido incita
la formación de pequeñas burbujas sometidas a
una rápida compresión y expansión adiabática,
que provoca un aumento local de la temperatura
y presión dentro de ellas, lo que puede provocar
un aumento en el rendimiento de extracción
15,16
.
Durante la sonicación, el proceso de cavitación
provoca el hinchamiento de las células, absorción del
solvente y una ampliación de los poros de la pared
celular con lo cual se permite una mayor difusividad
del solvente a través de los tejidos y los rendimientos
de extracción son favorecidos, así mismo debe
considerarse el hecho de que la sonicación puede
incitar el rompimiento de las paredes celulares y
facilitar el “lavado” del contenido de las mismas16.
La técnica es adicionalmente considerada como
una tecnología inserta en la Green Chemistry y
comparada con otras técnicas más sosticadas para
la extracción de estos metabolitos a escala industrial
la misma se reconoce como de más fácil operatividad
y bajo costo comparada con técnicas como extracción
supercrítica de uidos o microondas.
Una de las limitaciones de los procesos de
extracción de compuestos bioactivos es la anidad
del agente extractor y el substrato, así aunque
la extracción busque solubilizar los compuestos
fenólicos en la matriz, otros compuestos pueden
ser extraídos en el proceso. Por esta razón para
evaluar la pureza fenólica de los extractos estos se
puricaron con el empleo de columnas C
18.
El contenido de compuestos fenólicos totales
superior al reportado por Valdes–Hernández
18
para
hojas Moringa oleífera Lam variedad supergenius,
cultivadas en Instituto Finlay (La Habana, Cuba),
quienes reportaron valores de 17,5 mg/ g extracto
seco. Pakade y col., 19 han reportado valores de
42,5±0,14 mg/ g extracto seco en hojas de origen
nicaragüense, 28,7 ±4,0; 31,9 ±4,9 y 30,4±5,9 mg/ g
extracto seco en hojas pulverizadas para suplemento
distribuidas por proveedor comercial. Estos valores
son superiores a los determinados en este estudio,
sin embargo es importante destacar que los valores
en dichas investigaciones fueron determinados
en extractos cetónicos, los cuales a diferencia de
los etanólicos obtenidos en esta investigaciones
su aplicabilidad es cuestionable debido a su alta
toxicidad, por lo cual el etanol es un solvente más
atractivo para realizar estas extracciones ya que tiene
propiedades químicas a nes con los metabolitos a
extraer, siendo a la vez menos toxico.
Los valores obtenidos del contenido de
compuestos fenólicos (mg GAE/100g) son superiores
a los reportados para otras fuentes tradicionales
de estos metabolitos 11,8 ±6,0 (repollo), 14,4 ±2,6
(espinacas); 10,4 ±7,9 (frijoles) 14,7 ±3,9 (colior)
y 17,6 ±2,9 (brócoli) por lo cual su inclusión en
la dieta puede ser considerada como fuente de
compuestos fenólicos en la dieta con los efectos
positivos derivados y/o asociados para el benecio
del consumidor.
3.1. Screening toquímico de los extractos
etanolicos
Los resultados de la caracterización toquímica
del extracto etanólico en hojas Moringa oleífera Lam
Tabla 3. El extracto contiene taninos, avonoides,
terpenos y esteroides. No se evidenció la presencia
de alcaloides en lo extractos. La formación de
un precipitado rojo cuando los extractos fueron
tratados con solución Fehling indica la presencia
de glucósidos en su composición. Los avonoides
por su actividad antioxidante y microbiana y los
fenoles son potentes captadores de radicales libres,
antivirales, antimicrobianos y antinamatorios 20.
88 Caracterización química y contenido de compuestos fenólicos totales...
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Conclusión
Las hojas deshidratadas de Moringa oleífera
Lam son una fuente de compuestos fenólicos y otros
metabolitos secundarios para la dieta. Presentan
una calidad nutricional de elevada para el consumo
como suplemento dietético, principalmente como
fuente de hierro y proteínas.
Referencias bibliográcas
1. Ashwell R., Ndhlala, M., Van Staden, J. Molecules
15(3): 6905-6930. 2010
2. Benzie, I.; Choi, S. Advances in Food and
Nutrition Research 71: 1-53. 2016.
3. Martínez-Flórez, S., González-Gallego, J., Culebras,
J., Tuñón, M. Nutr Hosp. 17: 271-278. 2002.
4. Kyeong, J, Mi-Kyoung, K. Review Molecule 15:
7268-7291. 2010
5. Gülçin, I. Toxicol, 81: 345–391. 2012.
6. OLSON, M y FAHEY, J. Rev. Mex. Biodiv,
82(4):1071-1082. 2011
7. Jayaprakasha, K., Selvi, T., Sakariah, K. Food Res
Int, 36: 117–122. 2003.
8. Goyal, B., Agrawal, B., Goyal, R., Mehta, A.
Natural Products Radiance, 6 (4): 347-353.
2017.
9. Meyer, B., Ferrigni, R.; Putnam, E., Jacobsen, B.,
Nichols, E., Mc Laughling, J. Planta Med. 45 (1):
31-34. 1982.
10. Rodriguez E., Gutierrez, E., Quintero, R. Rev.
Cubana Plant Med, 3: 26-29. 1997.
11. Araya H.; Clavijo C.; Herrera C. ALAN 56 (4):
361-365. 2006.
12. Hernández-Varela, J, Moncayo, A, Fernández, V,
Sulbarán, B. Revista de la Sociedad Química
del Perú. 79 (2): 175-177. 2013
13. Singleton, V., Ross, J. Am. J. Enol. Vitic. 16: 44-
158.1965.
14. Galvan d’Alessandro, A., Kriaa, K., Nikov, I.,
Dimitrov, K. Separ Purif Tech 93: 42–47. 2016.
15. Tiwari, P., Kumar, B., Kaur, M., Kaur, G., Kaur, H.
Int. Pharm. Sci., 1(1): 98-106. 2011.
16. Japon-Lujan, R., Luque-Rodriguez, J., Luque de
Castro, M. J. Chromatogr. A., 110: 76–82. 2006.
17. Vinatoru, M. Ultrason. Sonochem, 8, 303–313.
2001.
18. Valdes-Hernandez, G., Viera, L., Comet-Rodriquez,
R. CENIC 40: 135-145. 2015.
19. Pakade, V., Cukrowska, V., Chimuka, L., South
African Journal of Science, 109 (3-4): 1-5.
2005
20. Marcano, D., Hasegawa, M., Fitoquímica Orgánica.
Segunda Edición, Caracas, Venezuela, Ediciones
Torino, pp. 117-234. 2002
Tabla 3. Análisis toquímico de extracto etanólicos de hojas Moringa oleífera Lam
Constituyente Prueba Resultado Descripción del resultado
Alcaloides
Ensayo de Mayer
Ensayo de Wagner
Ensayo de Dragendro
-
Formación de precipitado blanco
Formación de precipitado marrón
Formación de precipitado rojo
Flavonoides
Shinoda
Reactivo Alcalino
+
Coloración magenta
Coloración amarilla/incolora
Glucósidos
Ensayo de Fehling
Ensayo de Molich
-
Precipitado rojo
Formación anillo violeta
Saponinas Ensayo de espuma - Formación de espuma (< 20 s)
Taninos
Ensayo del cloruro férrico
Ensayo de gelatina
+
Precipitado verde oscuro
Precipitado blanco
Fitoesteroides
Ensayo de Salkowski
Ensayo Liebermann Burchard
+
Coloración amarilla
Anillo marrón
Diterpenos Ensayo de acetato de cobre + Coloración esmeralda
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